方法
（一）萃取溶媒開發
取本品粉末八份，每份精確稱定0.1 g，置50 mL離心管中稱定重量，精確加入40%甲醇、60%甲醇、80%甲醇、100%甲醇、95%乙醇、70%乙醇、50%乙醇、水各40 mL，超音波震盪處理(功率500 W，頻率40 kHz) 30分鐘。各提取液離心（3000 rpm, 15分鐘），過濾(Syringe filter, 0.45 μm)，取濾液，即得。每針10 μL注入高效能液相層析儀(HPLC)，以所測得每克重量之最大波峰面積為槐角最佳萃取溶媒。
（二）萃取次數考察
取本品粉末約0.1 g，精確秤定，置50 mL離心管中，精確加入50%乙醇40 mL，超音波震盪處理(功率500 W，頻率40 kHz) 30分鐘，離心（3000 rpm, 15分鐘），取上清液，過濾(Syringe filter, 0.45 μm)，取濾液，即得。殘渣部分重複上述方法再次萃取、進樣，直到指標成份被萃取完全，並選出最佳萃取次數。
（三）對照標準品溶液
取槐角苷(Sophoricoside)精確稱定20 mg，加50 mL的50%乙醇製成每1 mL含槐角苷(Sophoricoside) 400 μg的標準品儲備溶液。
（四）檢品溶液
取本品粉末精確稱定0.1 g，置50 mL離心管中，精密加入50%乙醇40 mL，超音波震盪處理(功率500 W，頻率40 kHz) 30分鐘。將提取液離心（3000 rpm, 15分鐘），取上清液1 mL，稀釋至2.5 mL，並過濾(Syringe filter, 0.45 μm)，取濾液，即得。
（五）測定法
分別精確吸取標準品溶液、檢品溶液10 μL，注入HPLC，測定，用標準曲線計算溶液中槐角苷(Sophoricoside)的含量，即得。
（六）檢量線
精確吸取槐角苷(Sophoricoside)標準品儲備溶液適量(400 μg/mL)，以50%乙醇稀釋製成含槐角苷(Sophoricoside)分別為200 μg/mL、40 μg/mL、20 μg/mL、4 μg/mL的標準品溶液。以上溶液各取10 μL分別注入HPLC進行定量分析，利用標準品之波峰面積(y軸)和標準品之濃度(x軸)進行線性回歸，並求得檢量線之方程式y = ax + b與相關係數R2。
（七）精密度試驗
以槐角苷(Sophoricoside)濃度為40 μg/mL之標準品液連續進樣五針，以槐角苷(Sophoricoside)波峰面積為指標，求出相對標準偏差。
（八）再現性與穩定性試驗
1. 再現性：取同一家市售槐角粉末，依槐角檢品溶液製備方法平行製備五份槐角檢品溶液，進樣測定，以槐角苷(Sophoricoside)波峰面積為指標，求出相對標準差。
2. 穩定性：取一家市售槐角粉末，依槐角檢品溶液製備方法製備一份槐角檢品溶液，分別在0、2、4、8、24小時進樣測定，以槐角苷(Sophoricoside)波峰面積為指標，求出相對標準差。
（九）偵測極限與定量極限試驗
偵測極限(Limit of Detection, LOD)：將已知濃度之標準品溶液不斷稀釋，並以訊號雜訊比≧3:1時之濃度，作為偵測極限估計值；定量極限(Limit of Quantitation, LOQ)：將已知濃度之標準品溶液不斷稀釋，並以訊號雜訊比≧10:1時之濃度，作為定量極限估計值。
（十）同日間與異日間差異試驗
取200、40、4 μg/ mL之標準品溶液進行同日間測試(在24小時內每個濃度注射三次)與異日間測試(七天內注射三次，每次間隔24小時以上，每個濃度重複注射三次)，求其相對標準差，以評估HPLC分析條件之穩定性與再現性。
（十一）添加回收率試驗
取已知槐角苷(Sophoricoside)含量的藥材粉末約0.1 g，精確稱定5份，分別置50 mL離心管中並稱定重量，再分別精確加入100 μg/mL槐角苷(Sophoricoside) 40 mL, 超音波震盪處理(功率500 W，頻率40 kHz) 30分鐘。將提取液離心（3000 rpm, 15分鐘），取上清液1 mL，稀釋至5.0 mL，並過濾(Syringe filter, 0.45 μm)，取濾液，即得。 |
