方法

（一）溶劑配製

水：乙腈(68：32至0：100)之混液。

（二）對照標準品溶液

取標準品桂皮醛(trans-Cinnamaldehyde)精確秤定20.0 mg，加甲醇定體積至25 mL製成每1 mL含桂皮醛(trans-Cinnamaldehyde) 800 μg的標準品儲備溶液。

取標準品香豆素(Coumarin)精確秤定5.0 mg，加甲醇定體積至25 mL製成每1 mL含香豆素(Coumarin) 200 μg的標準品儲備溶液。

取內標準品4-Hydroxy-3-methoxycinnamaldehyde 精確秤定25.0 mg，加甲醇定體積至25 mL製成每1 mL含4-Hydroxy-3-methoxycinnamaldehyde 1000 μg的內標準品(IS)儲備溶液。

（三）檢品溶液

取本品粉末約1.0 g，精確秤定，置125 mL三角錐形瓶中，加入甲醇50 mL，超音波震盪處理(功率200 W，頻率40 kHz) 30分鐘，以No.1濾紙過濾至50 mL之定量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻再過濾(Syringe filter, 0.45 mm)，取濾液4 mL加入1 mL之內標準品(IS)以甲醇定量至10 mL，即得。

（四）測定法

分別精確吸取標準品溶液、檢品溶液10 mL，注入液相層析儀，測定，用標準曲線計算溶液中桂皮醛(trans-Cinnamaldehyde)與香豆素(Coumarin)的   含量，即得。

（五）檢量線

精確吸取桂皮醛(trans-Cinnamaldehyde)標準品儲備溶液各500, 1000, 2000, 4000, 8000 mL，分別加入1000 mL之4-Hydroxy-3-methoxycinnam- aldehyde內標準品儲備溶液(IS)，以70%甲醇溶液定體積至10 mL配製成含桂皮醛(trans-Cinnamaldehyde)分別為640  、320 、160 、80 、40 mg/mL的標準品溶液。以上溶液各取10 mL分別注入液相層析儀進行定量分析。

精確吸取香豆素(Coumarin)標準品儲備溶液各500, 1000, 2000, 4000, 8000 mL，分別加入1000 mL之4-Hydroxy-3-methoxycinnamaldehyde內標準品儲備溶液(IS)，以70%甲醇溶液定體積至10 mL配製成含香豆素(Coumarin)分別為160  、80 、40 、20 、10 mg/mL的標準品溶液。以上溶液各取10 mL分別注入液相層析儀進行定量分析。

（六）精密度試驗

以桂皮醛(trans-Cinnamaldehyde)濃度為160 mg/mL之標準品儲備液連續進樣五針，以桂皮醛(trans-Cinnamaldehyde)波峰面積為指標，求出相對標準差。

以香豆素(Coumarin)濃度為160 mg/mL之標準品儲備液連續進樣五針，以香豆素(Coumarin)波峰面積為指標，求出相對標準差。

（七）再現性與穩定性試驗

1. 再現性：取同一家市售桂枝粉末，依桂枝檢品溶液製備方法平行製備五份桂枝檢品溶液，進樣測定，以桂皮醛(trans-Cinnamaldehyde)與香豆素(Coumarin)的含量(%)為指標，求出相對標準差。

2. 穩定性：取同一家市售桂枝粉末，依桂枝檢品溶液製備方法製備桂枝檢品溶液，分別在0、2、4、8、16、24小時進樣測定，以桂皮醛(trans-Cinnamaldehyde)與香豆素(Coumarin)的含量為指標，求出相對標準差。

（八）同日間與異日間試驗

取640  、320 、160 、80 、40 mg/mL之桂皮醛(trans-Cinnamaldehyde)標準品溶液與160  、80 、40 、20 、10 mg/mL之香豆素(Coumarin)標準品溶液進行同日間測試(intra-day test；在24小時內每個濃度重複注射三次)與異日間測試(inter-day test；7天內注射三次，每次間隔24小時以上，每個濃度重複注射三次)，求其相對標準差(R.S.D.，%)以評估液相層析儀分析條件之穩定性及再現性。

（九）偵測極限與定量極限試驗

1. 偵測極限(Limit of Detection, LOD)：將已知濃度之標準品溶液不斷稀釋，並以訊號雜訊比為≧ 3:1時之濃度，作為偵測極限估計值。

2. 定量極限(Limit of Quantitation, LOQ)：將已知濃度之標準品溶液不斷稀釋，並以訊號雜訊比為≧ 10/1時之濃度，作為定量極限估計值。

（十）添加回收率試驗

    取本品粉末約1.0 g，精確秤定三份，分別加入10.0 、20.0 、40.0 mg的桂皮醛(trans-Cinnamaldehyde)與2.5 、5.0 、10.0 mg的香豆素(Coumarin)，並按檢品溶液製備方法製備，每次取10 μL注入液相層析儀，每個檢測品進行三重複。