(Astragali Complanati Semen)
（一）萃取溶媒開發
取本品粉末五份，每份精確稱定0.5 g，置50 mL離心管中稱定重量，加入40%甲醇、80%乙醇、60%乙醇、40%乙醇、水各23 mL，超音波震盪處理(功率500 W，頻率40 kHz) 30分鐘，再稱定重量，用各溶劑補足25 mL對應溶媒所缺失的重量。各提取液離心（3000 rpm, 15分鐘），過濾(Syringe filter, 0.45 μm)，取濾液，即得。每針20 μL注入高效能液相層析儀(HPLC)，以所測得每克重量之最大峰面積為沙苑子最佳萃取溶媒。
（二）萃取次數考察
取本品粉末約0.5 g，精確秤定，置50 mL離心管中，精確加入40%乙醇25 mL，超音波震盪處理(功率500 W，頻率40 kHz) 30分鐘，離心（3000 rpm, 15分鐘），取上清液，過濾(Syringe filter, 0.45 μm)，取濾液，即得。每針20 μL注入HPLC，殘渣部分重複上述方法再次萃取、進樣，直到指標成份被萃取完全，並選出最佳萃取次數。
（三）對照標準品溶液
取沙苑子苷(Complanatuside)精密稱定15 mg，加100 mL的40%乙醇製成每1 mL含沙苑子苷(Complanatuside) 150 μg的標準品儲備溶液。
（四）檢品溶液
取本品粉末精確稱定0.5 g，置50 mL離心管中稱定重量，加入40%乙醇23 mL，超音波震盪處理(功率500 W，頻率40 kHz) 30分鐘，再稱定重量，補足25 mL 40%乙醇所缺失的重量。將提取液離心（3000 rpm, 15分鐘），取上清液過濾(Syringe filter, 0.45 μm)，取濾液，即得。
（五）測定法
分別精確吸取標準品溶液、檢品溶液20 μL，注入HPLC，測定，用標準曲線計算溶液中沙苑子苷(Complanatuside)的含量，即得。
（六）檢量線
精確吸取沙苑子苷(Complanatuside)標準品儲備溶液適量(150 μg/mL)，以40%乙醇稀釋製成含沙苑子苷(Complanatuside)分別為60 μg/mL、30 μg/mL、15 μg/mL、7.5 μg/mL、3.75 μg/mL的標準品溶液。以上溶液各取20 μL分別注入HPLC進行定量分析，利用標準品之波鋒面積(y軸)和標準品之濃度(x軸)進行線性回歸，並求得檢量線之方程式y = ax + b與相關係數R2。
（七）精密度試驗
以沙苑子苷(Complanatuside)濃度為15 μg/mL之標準品液連續進樣五針，以沙苑子苷(Complanatuside)波鋒面積為指標，求出相對標準偏差。
（八）再現性與穩定性試驗
1. 再現性：取同一家市售沙苑子粉末，依沙苑子檢品溶液製備方法平行製備五份沙苑子檢品溶液，進樣測定，以沙苑子苷(Complanatuside) 峰面積為指標，求出相對標準差。
2. 穩定性：取一家市售沙苑子粉末，依沙苑子檢品溶液製備方法製備一份沙苑子檢品溶液，分別在0、4、8、24小時進樣測定，以沙苑子苷(Complanatuside)峰面積為指標，求出相對標準差。
（九）偵測極限與定量極限試驗
偵測極限(Limit of Detection, LOD)：將已知濃度之標準品溶液不斷稀釋，並以訊號雜訊比≧3:1時之濃度，作為偵測極限估計值；定量極限(Limit of Quantitation, LOQ)：將已知濃度之標準品溶液不斷稀釋，並以訊號雜訊比為30:1時之濃度，作為定量極限估計值。
（十）同日間與異日間差異試驗
取60、15、1.9 μg/ mL之標準品溶液進行同日間測試(在24小時內每個濃度注射三次)與異日間測試(七天內注射三次，每次間隔24小時以上，每個濃度重複注射三次)，求其相對標準差，以評估HPLC分析條件之穩定性與再現性。
（十一）添加回收率試驗
取已知沙苑子苷(Complanatuside)含量的藥材粉末約0.5 g，精確稱定5份，分別置50 mL離心管中并稱定重量，再分別精密加入150 μg/mL沙苑子苷(Complanatuside) 2.5mL, 再加入40%乙醇21 mL，並按檢品溶液製作方法操作、測定。 |
