方法
（一）溶劑配製
水：乙腈(68：32至0：100)之混液。
（二）對照標準品溶液
取標準品桂皮醛(trans-Cinnamaldehyde)精確稱定20.0 mg，加甲醇定體積至25 mL製成每1 mL含桂皮醛(trans-Cinnamaldehyde) 800 μg的標準品 儲備溶液。
取標準品香豆素(Coumarin)精確稱定5.0 mg，加甲醇定體積至25 mL製成每1 mL含香豆素(Coumarin) 200 μg的標準品儲備溶液。
取內標準品4-Hydroxy-3-methoxycinnamaldehyde 精確稱定25.0 mg，加甲醇定體積至25 mL製成每1 mL含4-Hydroxy-3-methoxycinnamaldehyde 1000 μg的內標準品(IS)儲備溶液。
（三）檢品溶液
取本品粉末約1.0 g，精確稱定，置125 mL三角錐形瓶中，精確加入 甲醇50 mL，超音波4震盪處理(功率200 W，頻率40 kHz) 30分鐘，以No.1濾紙過濾至50 mL之定量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻再過濾(Syringe filter, 0.45 μm)，取濾液4 mL加入1 mL之內標準品(IS)以甲醇定量至10 mL， 即得。
（四）測定法
分別精確吸取標準品溶液與檢品溶液各10 μL，注入液相層析儀測定，用標準曲線計算溶液中桂皮醛(trans-Cinnamaldehyde)與香豆素(Coumarin)的 含量，即得。
（五）檢量線
精確吸取桂皮醛(trans-Cinnamaldehyde)標準品儲備溶液各500, 1000, 2000, 4000, 8000 μL，分別加入1000 μL之4-Hydroxy-3-methoxycinnam- aldehyde內標準品儲備溶液(IS)，以70%甲醇溶液定體積至10 mL配製成含桂皮醛(trans-Cinnamaldehyde)分別為640 、320 、160 、80.0 、40.0 μg/mL的標準品溶液。以上溶液各取10 μL分別注入液相層析儀進行定量分析，利用標準品之波峰面積(y軸)和標準品之濃度(x軸)進行線性回歸，並求得檢量線之方程式y = ax + b與相關係數R2。
精確吸取香豆素(Coumarin)標準品儲備溶液各500, 1000, 2000, 4000, 8000 μL，分別加入1000 μL之4-Hydroxy-3-methoxycinnamaldehyde內標準品儲備溶液(IS)，以70%甲醇溶液定体積至10 mL配製成含香豆素(Coumarin)分別為160 、80.0 、40.0 、20.0 、10.0 μg/mL的標準品溶液。以上溶液各取10 μL分別注入液相層析儀進行定量分析，利用標準品之波峰面積(y軸)和標準品之濃度(x軸)進行線性回歸，並求得檢量線之方程式y = ax + b與相關係數R2。
（六）精密度試驗
以桂皮醛(trans-Cinnamaldehyde)濃度為160 μg/mL之標準品儲備液連續進樣五針，以桂皮醛(trans-Cinnamaldehyde)波峰面積為指標，求出相對標準差。
以香豆素(Coumarin)濃度為160 μg/mL之標準品儲備液連續進樣五針，以香豆素(Coumarin)波峰面積為指標，求出相對標準差。
（七）再現性與穩定性試驗
1. 再現性：取同一家市售桂皮粉末，依桂皮檢品溶液製備方法平行製備五份桂皮檢品溶液，進樣測定，以桂皮醛(trans-Cinnamaldehyde)與香豆素(Coumarin)的含量(%)為指標，求出相對標準差。
2. 穩定性：取同一家市售桂皮粉末，依桂皮檢品溶液製備方法製備桂皮檢品溶液，分別在0、2、4、8、16、24小時進樣測定，以桂皮醛(trans-Cinnamaldehyde)與香豆素(Coumarin)的含量為指標，求出相對標準差。
（八）同日間與異日間試驗
取640 、320 、160 、80.0 、40.0 μg/mL之桂皮醛(trans-Cinnamaldehyde)標準品溶液與160 、80.0 、40.0 、20.0 、10.0 μg/mL之香豆素(Coumarin)標準品溶液進行同日間測試(intra-day test；在24小時內每個濃度重複注射三次)與異日間測試(inter-day test；7天內注射三次，每次間隔24小時以上，每個濃度重複注射三次)，求其相對標準差(R.S.D.，%)以評估液相層析儀分析條件之穩定性及再現性。
（九）偵測極限與定量極限試驗
偵測極限(Limit of Detection, LOD): 將已知濃度之標準品溶液不斷稀釋，並以訊號雜訊比為≧ 3:1時之濃度，作為偵測極限估計值。定量極Limit of Quantitation, LOQ): 將已知濃度之標準品溶液不斷稀釋，並以訊號雜訊比為≧ 10/1時之濃度，作為定量極限估計值。
（十）添加回收率試驗
1. 桂皮醛(trans-Cinnamaldehyde)
取本品粉末約1.0 g，精確稱定三份，分別加入40.0 、75.0 、150 mg的桂皮醛(trans-Cinnamaldehyde)，置125 mL三角錐形瓶中，精確加入 甲醇50 mL，超音波震盪處理(功率200 W，頻率40 kHz) 30分鐘，以No.1濾紙過濾至50 mL之定量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻再過濾(Syringe filter, 0.45 mm)，取濾液1 mL加入1 mL之內標準品(IS)以甲醇定量至10 mL，即得，每次取10 μL注入液相層析儀，每個檢測品進行三重複。
2. 香豆素(Coumarin)
取本品粉末約1.0 g，精確稱定三份，分別加入7.5 、15.0 、30.0 mg的香豆素(Coumarin)，並按檢品溶液製備方法製備，每次取10 μL注入液相層析儀，每個檢測品進行三重複。 |
