（一）萃取次數考察

取本品粉末約1.0 g，精確秤定，置50 mL三角錐形瓶中，精確加入甲醇20 mL，超音波震盪處理(功率200W，頻率40 kHz) 30分鐘，放冷再秤定重量，用甲醇補足減少的重量，搖勻並以No. 1濾紙和syringe filter (0.45 μm)分別過濾，取濾液，即得。每針10 μL注入HPLC，殘渣部分重複上述方法多次萃取、進樣，並選出最佳萃取次數。

（二）對照標準品溶液

取標準品胡薄荷酮(Pulegone)精確稱定10 mg，加100 mL的甲醇製成每1 mL含胡薄荷酮100 μg的標準品儲備溶液。

（三）檢品溶液

取本品粉末約0.5 g，精確秤定，置50 mL三角錐形瓶中，精確加入甲醇12.5 mL，超音波震盪處理(功率200W，頻率40 kHz) 30分鐘，以No. 1濾紙過濾至25 mL之定量瓶中，殘渣部分重複提取一次，合併濾液，加甲醇至刻度，搖勻再過濾(syringe filter, 0.45 μm)，取濾液，即得。

（四）測定法

分別精確吸取標準品溶液、檢品溶液10 μL，注入HPLC測定，用標準曲線計算溶液中胡薄荷酮(Pulegone)的含量，即得。

（五）檢量線

精確吸取胡薄荷酮(Pulegone)標準品儲備溶液適量(100 μg/mL)，以甲醇稀釋製成含胡薄荷酮(Pulegone)分別為100、50.0、25.0、10.0、5.0、2.0 μg/mL的標準品溶液。以上溶液各取10 μL分別注入HPLC進行定量分析，利用標準品之波峰面積(y軸)和標準品之濃度(x軸)進行線性回歸，並求得檢量線之方程式y=ax+b與相關係數R²。

（六）精密度試驗

以胡薄荷酮(Pulegone)濃度為10.0 μg/mL之標準品儲備液連續進樣五針，以胡薄荷酮波峰面積為指標，求出相對標準差。

（七）再現性與穩定性試驗

1. 再現性：取同一家市售荊芥粉末，依荊芥檢品溶液製備方法平行製備五份荊芥檢品溶液，進樣測定，以胡薄荷酮含量(%)為指標，求出相對標準差。
2. 穩定性：取同一家市售荊芥粉末，依荊芥檢品溶液製備方法製備荊芥檢品溶液，分別在0、2、4、8、16、24小時進樣測定，以胡薄荷酮(Pulegone)波峰面積為指標，求出相對標準差。

（八）偵測極限與定量極限試驗

偵測極限(limit of detection, LOD)：將已知濃度之標準品溶液不斷稀釋，並以訊號雜訊比為≧3:1時之濃度，作為偵測極限估計值；定量極限(limit of quantitation, LOQ)：將已知濃度之標準品溶液不斷稀釋，並以訊號雜訊比為≧10:1時之濃度，作為定量極限估計值。

（九）添加回收率試驗

取已知胡薄荷酮(Pulegone)含量的荊芥藥材粉末約0.25 g，精確稱定五份，分別加入1 mL的胡薄荷酮(Pulegone)溶液(94 μg/mL)，並按檢品溶液製備方法操作測定。