方法
（一）萃取次數考察
取本品粉末約0.25 g，精確稱定，置50 mL 三角錐形瓶中，精確加入甲醇20 mL，超音波震盪處理(功率200 W，頻率40 kHz) 30分鐘，以No.1濾紙過濾至10 mL之定量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，過濾(Syring filter，0.45 μm)，取濾液，即得。每針10 μL注入HPLC，殘渣部分重複上述方法多次萃取、進樣，直到指標成分被萃取完全，選出最佳萃取次數。
（二）溶劑配製
乙腈：水 (55：45至100：0)之混液。
（三）對照標準品溶液
取標準品吉馬酮(Germacrone)精確稱定10.0 mg，加甲醇定體積至10 mL製成每1 mL含1.0 mg吉馬酮(Germacrone)。
（四）檢品溶液
取本品粉末約0.25 g，精確稱定，置50 mL三角錐形瓶中，加入甲醇20 mL，超音波震盪處理(功率200 W，頻率40 kHz) 30分鐘，放置室溫，以No.1濾紙過濾。殘渣部分重複提取1次，合併濾液，轉移至100 mL濃縮瓶，減壓濃縮去除多量甲醇，後經微孔濾膜 (Syringe filter, 0.45 μm) 過濾至10 mL定量瓶，加甲醇至刻度，即得。
（五）測定法
分別精確吸取標準品溶液與檢品溶液各10 μL，注入液相層析儀，測定，用標準曲線計算溶液中吉馬酮(Germacrone)的含量，即得。
（六）檢量線
精確吸取吉馬酮(Germacrone)標準品儲備溶液(1.0 mg/mL)各0.1、0.25、0.5、1.0、2.5、5.0、10.0 mL，以甲醇溶液定體積至10 mL配製成吉馬酮(Germacrone)分別為10、25、50、100、250、500、1000 μg/mL的標準品溶液。以上溶液各取10 μL分別注入液相層析儀進行定量分析，利用標準品之波鋒面積(y軸)和標準品之濃度 (x軸)進行線性回歸，並求得檢量線之方程式y = ax + b與相關係數R2。
（七）精密度試驗
以吉馬酮(Germacrone)濃度為500 μg/mL之標準品儲備液連續進樣五針，以吉馬酮(Germacrone)波峰面積為指標，求出相對標準差。
（八）再現性與穩定性試驗
1. 再現性：取同一批市售莪朮粉末，依莪朮檢品溶液製備方法平行製備五份莪朮檢品溶液，進樣測定，以吉馬酮(Germacrone)的含量(%)為指標，求出相對標準差。
2. 穩定性：取同一批市售莪朮粉末，依莪朮檢品溶液製備方法製備莪朮檢品溶液，分別在0、2、4、8、16、24小時進樣測定，以吉馬酮(Germacrone)的含量為指標，求出相對標準差。
（九）偵測極限與定量極限試驗
偵測極限(Limit of Detection, LOD)：將已知濃度之標準品溶液不斷稀釋，並以訊號雜訊比為≧3:1時之濃度，作為偵測極限估計值。定量極Limit of Quantitation, LOQ)：將已知濃度之標準品溶液不斷稀釋，並以訊號雜訊比為≧10:1時之濃度，作為定量極限估計值。
（十）添加回收率試驗
取本品粉末約0.25 g，精確稱定三份，分別加入1.0 、2.0、3.0 mg的吉馬酮(Germacrone)，並按檢品溶液製備方法製備，每次取10 μL注入液相層析儀，每個檢測品進行三重複。 |
