方法
（一）萃取次數考察
取本品粉末約1.0 g，精確稱定，置100 mL三角錐形瓶中，精確加入甲醇25 mL，超音波震盪處理(功率200 W，頻率40 kHz) 30分鐘，放置室溫，以No.1濾紙過濾至25 mL定量瓶中，加入溶媒至刻度，搖勻，過濾(Syringe filter, 0.22 μm)，取濾液，即得。每針10 μL注入高效能液相層析儀(HPLC)，殘渣部分重複上述方法多次萃取、進樣，直到指標成分被萃取完全，並選出最佳萃取次數。
（二）對照標準品溶液
取標準品川續斷皂苷VI (Akebia saponin D)精確稱定1.0 mg，加1 mL的甲醇製成每1 mL含川續斷皂苷VI (Akebia saponin D) 1000 μg的標準品儲備溶液。
（三）檢品溶液
取本品粉末約1.0 g，精確稱定，置100 mL三角錐形瓶中，精確加入甲醇25 mL，超音波震盪處理(功率200 W，頻率40 kHz) 30分鐘，放置室溫，以No.1濾紙過濾。殘渣部分重複提取兩次，合併濾液，減壓濃縮至少量，轉移至25 mL之定量瓶中，加入溶媒至刻度，搖勻，過濾(Syringe filter, 0.22 μm)，取濾液，即得。
（四）測定法
分別精確吸取標準品溶液、檢品溶液10 μL，注入HPLC，測定，用標準曲線計算溶液中川續斷皂苷VI (Akebia saponin D)的含量，即得。
（五）檢量線
精確吸取川續斷皂苷VI (Akebia saponin D)標準品儲備溶液適量(1000 μg/mL)，以甲醇稀釋製成含川續斷皂苷VI (Akebia saponin D)分別為31.25 μg/mL、 62.5 μg/mL、125 μg/mL、250 μg/mL、500 μg/mL、1000 μg/mL的標準品溶液。以上溶液各取10 μL分別注入HPLC進行定量分析，利用標準品之波峰面積(y軸)和標準品之濃度(x軸)進行線性回歸，並求得檢量線之方程式y=ax+b與相關係數R2。
（六）精密度試驗
以川續斷皂苷VI (Akebia saponin D)濃度為62.5 μg/mL之標準品儲備液連續進樣五針，以川續斷皂苷VI (Akebia saponin D)波峰面積為指標，求出相對標準差。
（七）再現性與穩定性試驗
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再現性:取同一批市售續斷粉末，依續斷檢品溶液製備方法平行製備五份續斷檢品溶液，進樣測定，以川續斷皂苷VI (Akebia saponin D)含量(%)為指標，求出相對標準差。
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穩定性:取同一批市售續斷粉末，依續斷檢品溶液製備方法製備續斷檢品溶液，分別在0、2、4、8、16、24小時進樣測定，以川續斷皂苷VI (Akebia saponin D)波峰面積為指標，求出相對標準差。
（八）同日間與異日間試驗
取125、250、500 μg/ mL之川續斷皂苷VI (Akebia saponin D)標準品溶液進行同日間測試(在24小時內每個濃度注射三次)與異日間測試(七天內注射三次，每次間隔24小時以上，每個濃度重複注射三次)，求其相對標準偏差值(%)以評估HPLC分析條件之穩定性與再現性。
（九）偵測極限與定量極限試驗
偵測極限(Limit of Detection, LOD)：將已知濃度之標準品溶液不斷稀釋，並以訊號雜訊比為≧3:1時之濃度，作為偵測極限估計值；定量極限(Limit of Quantitation, LOQ)：將已知濃度之標準品溶液不斷稀釋，並以訊號雜訊比為≧10:1時之濃度，作為定量極限估計值。
（十）添加回收率試驗
取已知川續斷皂苷VI (Akebia saponin D)含量的續斷藥材粉末約0.5 g，精確稱定三份，分別加入0.4 mg、0.8 mg、1.2 mg的川續斷皂苷VI (Akebia saponin D)，並按檢品溶液製備方法操作測定。 |
