HPLC分析條件

1. 層析管：ACCHROM Unitary C18 Column (250 ´ 4.6 mm, 5 μm)

2. 檢測波長：UV 205 nm

3. 流速：1.0 mL/min

4. 管柱溫度：35 °C

5. 注入量：10 μL

6. 移動相：

（十）臺灣市售威靈仙含量測定

  取十批市售威靈仙藥材依檢品溶液製備方法製備檢品溶液，取各10 μL連續三針注入HPLC，所得平均波峰面積依附錄I公式計算樣品常春藤皂苷元(Hederagenin) 、齊墩果酸(Oleanolic acid)的百分含量。

（一）標準品常春藤皂苷元(Hederagenin) 、齊墩果酸(Oleanolic acid)之HPLC層析

    於滯留時間4.96、9.26分鐘處分別顯示常春藤皂苷元(Hederagenin) 、齊墩果酸(Oleanolic acid)標準品波峰(圖一)、(圖二)。

圖一、常春藤皂苷元(Hederagenin)標準品溶液之HPLC層析圖

圖二、齊墩果酸(Oleanolic acid)標準品溶液之HPLC層析圖

（二）市售威靈仙檢品之HPLC層析

    於滯留時間4.89、9.09分鐘處分別顯示威靈仙檢品中常春藤皂苷元(Hederagenin)、齊墩果酸(Oleanolic acid)波峰(圖三)。常春藤皂苷元(Hederagenin)分離率為R = 1.61，托尾因子為T = 1.02；齊墩果酸(Oleanolic acid)分離率為R = 8.77，托尾因子為T = 1.00均在系統適用性要求內。

圖三、市售威靈仙檢品之HPLC層析圖

(三)市售威靈仙藥材之HPLC指紋圖譜的建立

取十批市售威靈仙檢品溶液各10 μL進樣，進行HPLC指紋圖譜的測定。

1. 層析管：ACCHROM Unitary C18 Column (250 ´ 4.6 mm, 5 μm)

2. 檢測波長：UV 205 nm                        3. 流速：1.0 mL/min

4. 管柱溫度：35 ℃                                  5. 注入量：10 μL

6. 移動相：

10批威靈仙藥材之HPLC指紋圖譜