中醫藥品質分析(qaTCM)
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蓮子心
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方法

(一)萃取溶媒開發:

取本品粉末約0.2 g,六份,精確稱定,置50 mL離心管中,精密加入甲醇、75%甲醇、50%甲醇、乙醇、75%乙醇、50%乙醇各20 mL,超音波震盪處理(功率400 W,頻率40 kHz)30分鐘,離心15分鐘(4000 rpm),取上清液,過濾,取續濾液,即得。每針10 μL注入高效能液相層析儀,以所測得每單位重量之最大波峰面積為最佳蓮子心萃取溶媒。

 

(二)萃取次數考察:

取本品粉末約0.2 g,精確稱定,置50 mL離心管中,精確加入75%乙醇7 mL,超音波震盪處理(功率400 W,頻率40 kHz)30分鐘,離心15分鐘(4000 rpm),取上清液過濾,取續濾液,即得。每針以10 μL注入高效能液相層析儀,殘渣部分重複上述方法多次萃取、進樣,直到指標成分被萃取完全,並選出最佳萃取次數。

 

(三)對照標準品溶液:

取標準品蓮心鹼(Liensinine)適量,精密稱定,加75%乙醇製成每1 mL含蓮心鹼(Liensinine)126 μg的標準品儲備溶液。

 

(四)檢品溶液:

取本品粉末約0.2 g,精確稱定,置50 mL離心管中,精確加入75%乙醇7 mL,超音波震盪處理(功率400 W,頻率40 kHz)30分鐘,離心15分鐘(4000 rpm),將上清液轉移至25 mL定量瓶中,殘渣部分重複提取二次,合併上清液,以75%乙醇定容至25 mL,搖勻,過濾,取續濾液,即得。

 

(五)測定法:

分別精密吸取標準品溶液、檢品溶液10 μL,注入液相層析儀,測定,用標準曲線計算檢品溶液中蓮心鹼(Liensinine)的含量,即得。

 

 

(六)檢量線製作:

精密吸取蓮心鹼(Liensinine)標準品儲備液適量,以75%乙醇稀釋製成含蓮心鹼(Liensinine)分別為7.88 μg/mL、15.75 μg/mL、31.50 μg/mL、63.00 μg/mL、126.00 μg/mL的標準品溶液。

 

(七)精密度試驗:

以蓮心鹼(Liensinine)濃度為31.50 μg/mL之標準品溶液連續進樣五針,以蓮心鹼(Liensinine)波峰面積為指標,求出相對標準差。

 

(八)重複性與樣品穩定性試驗:

1. 重複性:取同一家市售蓮子心粉末,依蓮子心檢品溶液製備方法平行製備五份蓮子心檢品溶液,進樣測定,以蓮心鹼(Liensinine)含量(%)為指標,求出相對標準差。

2. 樣品穩定性:取同一家市售蓮子心粉末,精確稱取約0.2 g,依蓮子心檢品溶液製備方法製備蓮子心檢品溶液,分別在0、2、4、8、16、24小時進樣測定,以蓮心鹼(Liensinine)波峰面積為指標,求出相對標準差。

 

(九)偵測極限與定量極限試驗:

1. 偵測極限(Limit of Detection, LOD):將已知濃度之標準品溶液不斷稀釋,並以訊號雜訊比為3:1時之濃度,作為偵測極限之估計值。

2. 定量極限(Limit of Quantitation, LOQ):將已知濃度之標準品溶液不斷稀釋,並以訊號雜訊比為10:1時之濃度,作為定量極限之估計值。

 

(十)添加回收率試驗:

取已知蓮心鹼(Liensinine)含量的蓮子心藥材粉末約0.1 g,精密稱定五份,分別加入0.3150 mg的蓮心鹼(Liensinine),按檢品溶液製備方法操作、測定。