Home > 桂心 > 方法
桂心
藥材簡介
藥材材料
顯微鑑定
方法
HPLC分析
UPLC分析
TLC鑑定
化學成分
 
桂心

 (Guishin, Cinnamomi Xylem,Cinnamomum cassia Presl)

(一)萃取次數考察

取本品粉末約1.0 g,精確秤定,置125 mL三角錐形瓶中,精確加入甲醇50 mL,超音波震盪處理(功率200 W,頻率40 kHz) 30分鐘,以No.1濾紙過濾至50 mL之定量瓶中,加甲醇至刻度,搖勻,過濾(Syringe filter, 0.45 μm),取濾液,即得。每針10 μL注入HPLC,殘渣部分重複上述方法多次萃取、進樣,直到指標成份被萃取完全,並選出最佳萃取次數。

(二)對照標準品溶液

取標準品桂皮醛(trans-Cinnamaldehyde)精確秤定20.0 mg,加甲醇定體積至25 mL製成每1 mL含桂皮醛(trans-Cinnamaldehyde) 800 μg的標準品儲備溶液。

取標準品香豆素(Coumarin)精確秤定5.0 mg,加甲醇定體積至25 mL製成每1 mL含香豆素(Coumarin) 200 μg的標準品儲備溶液。

取內標準品4-hydroxy-3-methoxycinnamaldehyde 精確秤定25.0 mg,加甲醇定體積至25 mL製成每1 mL含4-hydroxy-3-methoxycinnamaldehyde 1000 μg的內標準品(IS)儲備溶液。

(三)檢品溶液

取本品粉末約1.0 g,精確秤定,置125 mL三角錐形瓶中,精確加入甲醇50 mL,超音波2震盪處理(功率200 W,頻率40 kHz) 30分鐘,以No.1濾紙過濾至50 mL之定量瓶中,加甲醇至刻度,搖勻再過濾(Syringe filter, 0.45 mm),取濾液4 mL加入1 mL之內標準品(IS)以甲醇定量至10 mL,即得。

(四)測定法

分別精確吸取標準品溶液與檢品溶液10 mL,注入HPLC,測定,用標準曲線計算溶液中桂皮醛(trans-Cinnamaldehyde)與香豆素(Coumarin)的含量,即得。

(五)檢量線

精確吸取桂皮醛(trans-Cinnamaldehyde)標準品儲備溶液各500, 1000, 2000, 4000, 8000 mL,分別加入1000 mL之4-hydroxy-3-methoxycinnam- aldehyde內標準品儲備溶液(IS),以70%甲醇溶液定體積至10 mL配製成含桂皮醛(trans-Cinnamaldehyde)分別為640  、320 、160 、80 、40 mg/mL的標準品溶液。以上溶液各取10 mL分別注入HPLC進行定量分析,利用標準品之波鋒面積(y軸)和標準品之濃度(x軸)進行線性回歸,並求得檢量線之方程式y = ax + b與相關係數R2

精確吸取香豆素(Coumarin)標準品儲備溶液各500, 1000, 2000, 4000, 8000 mL,分別加入1000 mL之4-hydroxy-3-methoxycinnamaldehyde內標準品儲備溶液(IS),以70%甲醇溶液定体積至10 mL配製成含香豆素(Coumarin)分別為160  、80 、40 、20 、10 mg/mL的標準品溶液。以上溶液各取10 mL分別注入HPLC進行定量分析,利用標準品之波鋒面積(y軸)和標準品之濃度(x軸)進行線性回歸,並求得檢量線之方程式y = ax + b與相關係數R2

(六)精密度試驗

以桂皮醛(trans-Cinnamaldehyde)濃度為160 mg/mL之標準品儲備液連續進樣五針,以桂皮醛(trans-Cinnamaldehyde)波鋒面積為指標,求出相對標準差。

以香豆素(Coumarin)濃度為160 mg/mL之標準品儲備液連續進樣五針,以香豆素(Coumarin)波鋒面積為指標,求出相對標準差。

(七)再現性與穩定性試驗

1. 再現性:取同一家市售桂心粉末,依桂心檢品溶液製備方法平行製備五份桂心檢品溶液,進樣測定,以桂皮醛(trans-Cinnamaldehyde)與香豆素(Coumarin)的含量(%)為指標,求出相對標準差。

2. 穩定性:取同一家市售桂心粉末,依桂心檢品溶液製備方法製備桂心檢品溶液,分別在0、2、4、8、16、24小時進樣測定,以桂皮醛(trans-Cinnamaldehyde)與香豆素(Coumarin)的含量為指標,求出相對標準差。

(八)偵測極限與定量極限試驗

偵測極限(Limit of Detection, LOD):將已知濃度之標準品溶液不斷稀釋,並以訊號雜訊比為≥ 3:1時之濃度,作為偵測極限估計值。定量極Limit of Quantitation, LOQ): 將已知濃度之標準品溶液不斷稀釋,並以訊號雜訊比為≥ 10/1時之濃度,作為定量極限估計值。

(九)同日間與異日間試驗

取640  、320 、160 、80 、40 mg/mL之桂皮醛(trans-Cinnamaldehyde)標準品溶液與160  、80 、40 、20 、10 mg/mL之香豆素(Coumarin)標準品溶液進行同日間測試(intra-day test;在24小時內每個濃度重複注射三次)與異日間測試(inter-day test;7天內注射三次,每次間隔24小時以上,每個濃度重複注射三次),求其相對標準差(R.S.D.,%)以評估HPLC分析條件之穩定性及再現性。

(十)添加回收率試驗

1. 桂皮醛(trans-Cinnamaldehyde) : 取本品粉末約1.0 g,精確秤定,依桂心檢品溶液製備方法製備桂心檢品溶液,取4.0 mL桂心檢品溶液分別加入濃度為240、160及80 μg/mL之標準品溶液及1 mL之內標準品(IS),再以甲醇定量至10 mL,每次取10 μL注入HPLC,每個檢測品進行三重複。

2. 香豆素(Coumarin): 取本品粉末約1.0 g,精確秤定,依桂心檢品溶液製備方法製備桂心檢品溶液,取4.0 mL桂心檢品溶液分別加入濃度為40、20及10 μg/mL之標準品溶液及1 mL之內標準品(IS),再以甲醇定量至10 mL,每次取10 μL注入HPLC,每個檢測品進行三重複。