二、萃法選擇及濃度測試
實驗日期：105/07/26
相對溼度(RH)：66%
溫度(RT)：28 ℃
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【展開劑2】 (修飾香港中藥材標準第六冊) ──正己烷：乙酸乙酯：甲酸 (9：2：0.2)
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編號
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名稱
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含量
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1，2，3
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乙醯紫草素(Acetylshikonin) (0.5 mg/mL)
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1，2，5 μL
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4，5，6
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β, β'-二甲基丙烯醯阿卡寧
(β, β'-Dimethylacrylalkannin) (0.5 mg/mL)
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1，2，5 μL
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7，8，9
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檢品溶液4【萃取方法1】
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2，5，8 μL
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10，11，12
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檢品溶液4【萃取方法2】
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2，5，8 μL
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13，14，15
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檢品溶液4【萃取方法3】
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2，5，8 μL
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建議萃法：3種萃法之檢品溶液中皆有分離與檢出標準品乙醯紫草素及β, β'-二甲基丙烯醯阿卡寧，而由於製備簡便且快速，故選擇【萃取方法3】。
建議點注量：乙醯紫草素(Acetylshikonin)標準品溶液2 μL，β, β'-二甲基丙烯醯阿卡寧(β, β'-Dimethylacrylalkannin)標準品溶液5 μL，檢品溶液【萃取方法3】8 μL。
三、溶媒系統選擇
實驗日期：105/07/27
相對溼度(RH)：61%
溫度(RT)：26 ℃
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【展開劑1】 (臺灣中藥典第二版2013；修飾中華人民共和國藥典2015) ──正己烷：甲苯：乙酸乙酯：甲酸 (5：5：0.5：0.1)
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【萃取方法3】(自行開發) ── HPTLC 紫外光(365 nm)檢出 (乙醯紫草素Rf值為0.49、β, β'-二甲基丙烯醯阿卡寧Rf值為0.65)
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【展開劑2】 (修飾香港中藥材標準第六冊) ──正己烷：乙酸乙酯：甲酸 (9：2：0.2)
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【萃取方法3】(自行開發) ── HPTLC 紫外光(365 nm)檢出 (乙醯紫草素Rf值為0.53、β, β'-二甲基丙烯醯阿卡寧Rf值為0.66)
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1：Blank
2：乙醯紫草素(Acetylshikonin)
3：β, β'-二甲基丙烯醯阿卡寧(β, β'-Dimethylacrylalkannin)
4，5：檢品溶液4
6：Spike
建議溶媒系統：以【萃取方法3】方式，2種展開劑展開皆可從檢品溶液中分離與檢出乙醯紫草素及β, β'-二甲基丙烯醯阿卡寧，而由於展開溶媒條件較簡便，故採用修飾香港中藥材標準第六冊之【展開劑2】。
四、觀察方式選擇
實驗日期：105/07/27
相對溼度(RH)：61%
溫度(RT)：26 ℃
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【展開劑2】 (修飾香港中藥材標準第六冊) ──正己烷：乙酸乙酯：甲酸 (9：2：0.2)
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【萃取方法3】(自行開發) ─ HPTLC可見光檢出
【萃取方法3】(自行開發) ─ HPTLC紫外光(254 nm)檢出
【萃取方法3】(自行開發) ─ HPTLC紫外光(365 nm)檢出
1：Blank
2：乙醯紫草素(Acetylshikonin)
3：β, β'-二甲基丙烯醯阿卡寧(β, β'-Dimethylacrylalkannin)
4，5：檢品溶液4
6：Spike
建議觀察方式：於紫外光(365 nm)檢視較其他觀察方式下顯示出較多條帶，且有明顯之乙醯紫草素(Acetylshikonin)及β, β'-二甲基丙烯醯阿卡寧(β, β'-Dimethylacrylalkannin)標準品斑點。
五、十家樣品檢測
實驗日期：105/07/28
相對溼度(RH)：59%
溫度(RT)：27 ℃
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【展開劑2】 (修飾香港中藥材標準第六冊) ──正己烷：乙酸乙酯：甲酸 (9：2：0.2)
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【萃取方法3】(自行開發) ── HPTLC 紫外光(365 nm)檢出
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1
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Blank
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2
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乙醯紫草素(Acetylshikonin) (0.5 mg/mL)
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3
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β, β'-二甲基丙烯醯阿卡寧(β, β'-Dimethylacrylalkannin) (0.5 mg/mL)
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4，5
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檢品溶液1 (NF)
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6，7
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檢品溶液2 (NJ)
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8，9
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檢品溶液3 (NN)
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10，11
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檢品溶液4 (NR)
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12，13
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檢品溶液5 (CD)
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14
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Spike (檢品溶液4)
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1
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Blank
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2
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乙醯紫草素(Acetylshikonin) (0.5 mg/mL)
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3
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β, β'-二甲基丙烯醯阿卡寧(β, β'-Dimethylacrylalkannin) (0.5 mg/mL)
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4，5
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檢品溶液6 (SC)
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6，7
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檢品溶液7 (SE)
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8，9
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檢品溶液8 (SG)
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10，11
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檢品溶液9 (SJ)
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12，13
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檢品溶液10 (NC)
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14
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Spike (檢品溶液4)
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結論與建議：以自行開發之【萃取方法3】方式，並以修飾香港中藥材標準第六冊之【展開劑2】分離與檢出乙醯紫草素(Acetylshikonin)及β, β'-二甲基丙烯醯阿卡寧(β, β'-Dimethylacrylalkannin)展開溶媒條件較簡便，於紫外光(365 nm)下檢視條帶較多。 |
