方法

（一）最佳萃取溶媒開發

    取本品粉末七份，每份精確稱定1.0 g，置100 mL三角錐形瓶中，精確加入甲醇、75%甲醇、50%甲醇、乙醇、75%乙醇、50%乙醇、水各25 mL，超音波震盪處理(功率300 W，頻率40 kHz) 30分鐘，冷卻後以No. 1濾紙過濾，取得濾液搖勻再過濾(Syringe filter, 0.22 μm)，即得。每針10 μL注入高效液相層析儀(HPLC)，以所測得每克重量之標準品羅漢果甜苷V (Mogroside V)最大波峰面積為最佳羅漢果萃取溶媒。

（二）最佳萃取次數評估

    取本品粉末約1.0 g (過第20號篩網)，精確稱定，置100 mL三角錐形瓶中，精確加入甲醇25 mL，超音波震盪處理(功率300 W，頻率40 kHz) 30分鐘，冷卻後以No.1濾紙過濾，濾液加甲醇定容至25 mL，搖勻再過濾(Syringe filter, 0.22 μm)，取濾液，即得。每針10 μL注入HPLC，殘渣部分重複上述方法多次萃取、進樣，直到指標成分被萃取完全，並選出最佳萃取次數。

（三）對照標準品溶液

    取標準品羅漢果甜苷V (Mogroside V)精確稱定1.0 mg，加1 mL的甲醇製成每1 mL含羅漢果甜苷V (Mogroside V) 1000 μg的標準品儲備溶液，並以甲醇稀釋至250 μg/mL製成對照標準品溶液。

（四）檢品溶液

    取本品粉末(過第20號篩網)約1.0 g，精確稱定，置100 mL三角錐形瓶中，精確加入甲醇25 mL，超音波震盪處理(功率300 W，頻率40 kHz) 30分鐘，以No.1濾紙過濾。殘渣部分重複提取2次，合併濾液，減壓濃縮至少量，轉移至25 mL之定量瓶中，加入溶媒至刻度，搖勻再過濾(Syringe filter, 0.22 μm)，即得。

（五）測定法       

    分別精確吸取對照標準品溶液(250 μg/mL)、檢品溶液10 mL，注入HPLC，測定，用標準曲線計算溶液中羅漢果甜苷V (Mogroside V)的含量，即得。

（六）檢量線

    精確吸取羅漢果甜苷V (Mogroside V)標準品儲備溶液適量(1000 μg/mL)，以甲醇稀釋製成含羅漢果甜苷V (Mogroside V)分別為1000、500、250、125、62.5 μg/mL的標準品溶液。以上溶液各取10 μL分別注入HPLC進行定量分析，利用標準品之波峰面積(y軸)和標準品之濃度(x軸)進行線性回歸，並求得檢量線之方程式y=ax+b與相關係數R²。

（七）精密度試驗

    以羅漢果甜苷V (Mogroside V)濃度為250 μg/mL之對照標準品溶液連續進樣五針，以羅漢果甜苷V (Mogroside V)波峰面積為指標，求出相對標準差。

（八）再現性與穩定性試驗

1. 再現性:取同一批市售羅漢果粉末，依羅漢果檢品溶液製備方法平行製備五份羅漢果檢品溶液，進樣測定，以羅漢果甜苷V (Mogroside V)含量(%)為指標，求出相對標準差。
2. 穩定性:取同一批市售羅漢果粉末，依羅漢果檢品溶液製備方法製備羅漢果檢品溶液，分別在0、2、4、8、16、24小時進樣測定，以羅漢果甜苷V (Mogroside V)波峰面積為指標，求出相對標準差。

（九）偵測極限與定量極限試驗

    偵測極限(Limit of Detection, LOD)：將已知濃度之標準品溶液不斷稀釋，並以訊號雜訊比為≧3:1時之濃度，作為偵測極限估計值；定量極限(Limit of Quantitation, LOQ)：將已知濃度之標準品溶液不斷稀釋，並以訊號雜訊比為≧10:1時之濃度，作為定量極限估計值。

（十）添加回收率試驗

    取已知羅漢果甜苷V (Mogroside V)含量的羅漢果藥材粉末約0.5 g，精確稱定五份，分別加入8.75 mg的羅漢果甜苷V (Mogroside V)，並按檢品溶液製備方法操作測定。