中醫藥品質分析(qaTCM)
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蕎麥
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方法

(一)萃取方法開發:

取本品粉末約0.5 g,精確稱定,置125 mL錐形瓶中,精確加入甲醇20 mL,加熱回流30分鐘。濾過,將濾液轉移於100 mL圓底燒瓶中,用減壓旋轉濃縮儀減壓蒸乾,以甲醇回溶並轉移於10 mL定量瓶中,加甲醇定容至10 mL,搖勻,過濾,取續濾液,即得。殘渣部分重複上述方法多次萃取、進樣,直到指標成分被萃取完全,並選出最佳萃取次數。

 

(二)對照標準品溶液:

取標準品芸香苷(Rutin)適量,精密稱定,加甲醇製成每1 mL含芸香苷(Rutin)78 μg的標準品儲備溶液。

 

(三)檢品溶液:

取本品粉末約0.5 g,精確稱定,置125 mL錐形瓶中,精確加入甲醇20 mL,加熱回流30分鐘。濾過,將濾液轉移於100 mL圓底燒瓶中,殘渣部分重複提取1次,合併濾液。用減壓旋轉濃縮儀減壓蒸乾,以甲醇回溶並轉移於10 mL定量瓶中,加甲醇至刻度,搖勻,過濾,取續濾液,即得。

 

(四)測定法:

分別精密吸取標準品溶液、檢品溶液10 μL,注入液相層析儀,測定,用標準曲線計算檢品溶液中芸香苷(Rutin)的含量,即得。

 

(五)檢量線製作:

精密吸取芸香苷(Rutin)標準品儲備液適量,以甲醇稀釋製成含芸香苷(Rutin)分別為1.22 μg/mL、2.44 μg/mL、4.88 μg/mL、9.75 μg/mL、19.50 μg/mL的標準品溶液。

 

(六)精密度試驗:

以芸香苷(Rutin)濃度為19.50 μg/mL之標準品溶液連續進樣五針,以芸香苷(Rutin)波峰面積為指標,求出相對標準差。

(七)重複性與樣品穩定性試驗:

1. 重複性:取同一家市售蕎麥粉末,依蕎麥檢品溶液製備方法平行製備五份蕎麥檢品溶液,進樣測定,以芸香苷(Rutin)含量(%)為指標,求出相對標準差。

2. 樣品穩定性:取同一家市售蕎麥粉末,精確稱取約0.5 g,依蕎麥檢品溶液製備方法製備蕎麥檢品溶液,分別在0、2、4、8、16、24小時進樣測定,以芸香苷(Rutin)波峰面積為指標,求出相對標準差。

 

(八)偵測極限與定量極限試驗:

1. 偵測極限(Limit of Detection, LOD):將已知濃度之標準品溶液不斷稀釋,並以訊號雜訊比為3:1時之濃度,作為偵測極限之估計值。

2. 定量極限(Limit of Quantitation, LOQ):將已知濃度之標準品溶液不斷稀釋,並以訊號雜訊比為10:1時之濃度,作為定量極限之估計值。

 

(九)添加回收率試驗:

取已知芸香苷(Rutin)含量的蕎麥藥材粉末約0.25 g,精密稱定五份,分別加入0.0330 mg的芸香苷(Rutin),按檢品溶液製備方法操作、測定。