方法
（一）最佳萃取條件評估
取本品粉末4份，每份準確稱取0.5 g，2份置100 mL圓底瓶中，分別準確加入甲醇與甲醇-稀鹽酸(100：1)各30 mL，加熱迴流30分鐘，冷卻後以No. 1濾紙過濾，取濾液，搖勻再過濾(Syringe filter, PTFE 0.22 μm)，即得。另外2份置於50 mL離心管，分別準確加入甲醇與甲醇-稀鹽酸(100：1)各30 mL，以超音波振盪處理(功率300 W，頻率40 kHz) 30分鐘，再以No. 1濾紙過濾，取濾液，搖勻再過濾(Syringe filter, PTFE 0.22 μm)，即得。每針10 μL注入高效能液相層析儀(HPLC)，以所測得每克重量之標準品氯化小蘗鹼最大波峰面積為最佳黃蘗萃取溶媒。
（二）最佳萃取次數評估
準確稱取本品粉末(過第20號篩網) 2份，每份準確稱取0.5 g，置於100 mL圓底瓶中，準確加入甲醇-稀鹽酸(100：1)各30 mL，冷卻後以No. 1濾紙過濾，濾液轉移至30 mL定量瓶中，加甲醇至刻度。搖勻再過濾(Syringe filter, PTFE 0.22 μm)，即得。每針10 μL注入HPLC，殘渣部分重複上述方法多次萃取、進樣，直到指標成分被萃取完全，並選出最佳萃次數。
（三）對照標準品溶液
準確稱取標準品氯化小蘗鹼5.0 mg，加5 mL甲醇製成每1 mL含1000 μg的標準品儲備溶液，並以甲醇稀釋至100 μg/mL製成對照標準品溶液。
（四）檢品溶液
準確稱取本品粉末(過第20號篩網)約 0.5g，置100 mL圓底瓶中，準確加入甲醇-稀鹽酸(100：1) 30 mL，加熱迴流30分鐘，冷卻後以No. 1濾紙過濾，取濾液，殘渣部分重複提取1次，合併濾液，轉移至100 mL定量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻再過濾(Syringe filter, PTFE 0.22 mm)，即得。
（五）測定法
分別準確吸取對照標準品溶液、檢品溶液10 μL，注入HPLC，測定，用標準曲線計算溶液中氯化小蘗鹼的含量，即得。
（六）檢量線
準確吸取氯化小蘗鹼標準品儲備液適量(1000 μg/mL)，以甲醇稀釋成含氯化小蘗鹼分別為250、125、100、50、25、5.0 μg/mL的標準品溶液。以上溶液各取10 μL分別注入HPLC進行定量分析，利用標準品之波峰面積(y軸)和標準品之濃度(x軸)進行線性回歸，並求得檢量線之方程式y = ax + b與相關係數R2。
（七）精密度試驗
以氯化小蘗鹼濃度為100 μg/mL之對照標準品溶液連續進樣5針，以氯化小蘗鹼的波峰面積為指標，求出相對標準差。
（八）重複性與穩定性試驗
1. 重複性：取同一批市售黃蘗粉末，依黃蘗檢品溶液製備方法平行製備5份黃蘗檢品溶液，進樣測定，以氯化小蘗鹼的含量(%)為指標，求出相對標準差。
2. 穩定性：取同一批市售黃蘗粉末，依黃蘗檢品溶液製備方法製備黃蘗檢品溶液，分別在0、2、4、8、24小時進樣測定，以氯化小蘗鹼的含量為指標，求出相對標準差。
（九）偵測極限與定量極限試驗
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偵測極限(Limit of Detection, LOD)：將已知濃度之標準品溶液不斷稀釋，並以訊號雜訊比為≧3:1時之濃度，作為偵測極限估計值。
2. 定量極限(Limit of Quantitation, LOQ)：將已知濃度之標準品溶液不斷稀釋，並以訊號雜訊比為≧10:1時之濃度，作為定量極限估計值。
（十）添加回收率試驗
取已知氯化小蘗鹼含量的黃蘗粉末5份，每份準確稱取約0.1 g，分別加入1 mL的氯化小蘗鹼溶液(4.0 mg/mL)，並按檢品溶液製備方法操作測定。
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