一）對照標準品溶液
取標準品橙皮柑(Hesperidin)精確秤定1 mg，加甲醇定體積至10 mL 製成每1 mL含0.1 mg橙皮柑(Hesperidin)。
（二）檢品溶液
取本品粉末約0.2 g，精確秤定，置125 mL三角錐形瓶中，精確加入 甲醇20 mL，超音波震盪處理(功率200 W，頻率40 kHz) 30 分鐘，以No.1濾紙過濾至25 mL之定量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻再過濾(Syringe filter, 0.22 mm)，即得。
（三）測定法
分別精確吸取標準品溶液與檢品溶液10 mL，注入HPLC，測定，用 標準曲線計算溶液中橙皮柑(Hesperidin)的含量，即得。
（四）檢量線
精確吸取橙皮柑(Hesperidin)標準品儲備液適量(100 μg/mL)，以100%甲醇稀釋成含橙皮柑(Hesperidin)分別為60 μg/mL、50 μg/mL、25 μg/mL、5 μg/mL、1 μg/mL的標準品溶液。以上溶液各取10 mL分別注入HPLC進行定量分析，利用標準品之波峰面積(y軸)和標準品之濃度(x軸)進行線性回歸，並求得檢量線之方程式y=ax+b與相關係數R2。
（五）精密度試驗
以橙皮柑(Hesperidin)濃度為50 mg/mL之標準品儲備液連續進樣五針，以橙皮柑(Hesperidin)波峰面積為指標，求出相對標準差。
（六）再現性與穩定性試驗
1. 再現性:取同一家市售陳皮粉末，依陳皮檢品溶液製備方法平行製備五份陳皮檢品溶液，進樣測定，以橙皮柑(Hesperidin)的含量(%)為指標，求出相對標準差。
2. 穩定性:取同一家市售陳皮粉末，依陳皮檢品溶液製備方法製備陳皮檢品溶液，分別在0、2、4、8、16、24小時進樣測定，以橙皮柑(Hesperidin)的含量為指標，求出相對標準差。
（七）偵測極限與定量極限試驗
偵測極限(Limit of Detection, LOD): 將已知濃度之標準品溶液不斷稀釋，並以訊號雜訊比為≧ 3:1時之濃度，作為偵測極限估計值。定量極Limit of Quantitation, LOQ): 將已知濃度之標準品溶液不斷稀釋，並以訊號雜訊比為≧ 10/1時之濃度，作為定量極限估計值。
（八）添加回收率試驗
取已知橙皮柑(Hesperidin)含量的陳皮藥材粉末0.02 g，精確秤定五份，分別加入1.0 mg的橙皮柑 (Hesperidin)，並按檢品溶液製備方法製備，每次取10 μL注入。 |
