方法

（一）最佳萃取條件評估

取本品粉末2份，每份準確稱取0.2 g，1份置100 mL圓底瓶中，準確加入甲醇50 mL，加熱迴流處理1小時；1份置50 mL離心管中，準確加入甲醇50 mL，超音波振盪處理(功率300 W，頻率40 kHz) 1小時，以No. 1濾紙過濾，濾液移入至50 mL容量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻再過濾(Syringe filter, PTFE 0.22 μm)，即得。每針10 μL注入高效能液相層析儀(HPLC) 以所測得每克重量之標準品橙皮苷最大波峰面積為最佳青皮萃取條件。

（二）最佳萃取時間評估

準確稱取本品粉末(過第20號篩網) 3份，每份準確稱取0.2 g，置100 mL圓底瓶中，準確加入甲醇各50 mL，加熱迴流1小時、2小時、3小時，冷卻後，以No. 1濾紙過濾，取濾液移入50 mL容量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻再過濾(Syringe filter, PTFE 0.22 μm)，即得。每針10 μL注入高效能液相層析儀(HPLC)，以測得標準品橙皮苷最大波峰面積為最佳青皮萃取時間。

（三）對照標準品溶液

準確稱取標準品橙皮苷 1.0 mg，加2.0 mL的甲醇製成每1 mL含橙皮苷500 μg的標準品儲備溶液，並以甲醇稀釋至200 μg/mL製成對照標準品溶液。

（四）檢品溶液

準確稱取本品粉末(過第20號篩網)約0.2 g，置100 mL圓底瓶中，準確加入甲醇50 mL，加熱迴流處理1小時，冷卻後，以No. 1濾紙過濾，濾液移入50 mL容量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻再過濾(Syringe filter, PTFE 0.22 μm)，即得。

（五）測定法       

分別準確吸取對照標準品溶液、檢品溶液10 μL，注入HPLC，測定，用標準曲線分別計算溶液中橙皮苷的含量，即得。

（六）檢量線

準確吸取橙皮苷標準品儲備溶液適量(500 μg/mL)，以甲醇稀釋成含橙皮苷分別為200、100、50、25、10 μg/mL的標準品溶液。以上溶液各取10 μL分別注入HPLC進行定量分析，利用標準品之波峰面積(y軸)和標準品之濃度(x軸)進行線性回歸，並求得檢量線之方程式y = ax + b與相關係數R²。

（七）精密度試驗

以橙皮苷為200 μg/mL之對照標準品溶液連續進樣5針，以橙皮苷的波峰面積為指標，求出相對標準差。

（八）重複性與穩定性試驗

1. 重複性：取同一批市售青皮藥材粉末，依青皮藥材檢品溶液製備方法平行製備5份青皮檢品溶液，進樣測定，以橙皮苷的含量(%)為指標，求出相對標準差。
2. 穩定性：取同一批市售青皮藥材粉末，依青皮藥材檢品溶液製備方法製備青皮檢品溶液，分別在0、2、4、8、16、24小時進樣測定，以橙皮苷的波峰面積為指標，求出相對標準差。

（九）偵測極限與定量極限試驗

1.  偵測極限(Limit of Detection, LOD)：將已知濃度之標準品溶液不斷稀釋，並以訊號雜訊比為≧3:1時之濃度，作為偵測極限估計值。

2.  定量極限(Limit of Quantitation, LOQ)：將已知濃度之標準品溶液不斷稀釋，並以訊號雜訊比為≧10:1時之濃度，作為定量極限估計值。

（十）添加回收率試驗

取已知橙皮苷含量的青皮藥材粉末5份，每份準確稱取約0.1 g，分別加入橙皮苷 6.0 mg，並按檢品溶液製備方法操作測定。