方法
(一)溶劑配製
水:甲醇(21:79至0:100)之混液。
(二)對照標準品溶液
取標準品蒼朮素(Atractylodin)精確秤定5.0 mg,加甲醇定體積至10 mL 製成每1 mL含0.5 mg蒼朮素。
(三)檢品溶液
取本品粉末約0.2 g,精確秤定,置125 mL三角錐形瓶中,精確加入 甲醇50 mL,超音波震盪處理(功率200 W,頻率40 kHz) 1小時,以No.1濾紙過濾至50 mL之定量瓶中,加甲醇至刻度,搖勻再過濾(Syringe filter, 0.45 mm),即得。
(四)測定法
分別精確吸取標準品溶液與檢品溶液10 mL,注入液相層析儀,測定,用標準曲線計算溶液中蒼朮素(Atractylodin)的含量,即得。
(五)檢量線
精確吸取蒼朮素(Atractylodin) 標準品儲備溶液(0.5 mg/mL)各100、500、1000、2000、 5000 mL,以甲醇溶液定體積至10 mL配製成蒼朮素(Atractylodin)分別為5、25、50、100、250、500 mg/mL的標準品溶液。以上溶液各取10 mL分別注入液相層析儀進行定量分析,利用標準品之波峰面積(y軸)和標準品之濃度 (x軸)進行線性回歸,並求得檢量線之方程式y = ax + b與相關係數R2。
(六)精密度試驗
以蒼朮素(Atractylodin)濃度為250 mg/mL之標準品儲備液連續進樣五針,以蒼朮素波峰面積為指標,求出相對標準差。
(七)再現性與穩定性試驗
1. 再現性:取同一家市售蒼朮粉末,依蒼朮檢品溶液製備方法平行製備五份蒼朮檢品溶液,進樣測定,以蒼朮素(Atractylodin)的含量(%)為指標,求出相對標準差。
2. 穩定性:取同一家市售蒼朮粉末,依蒼朮檢品溶液製備方法製備蒼朮檢品溶液,分別在0、2、4、8、16、24小時進樣測定,以蒼朮素(Atractylodin)的含量為指標,求出相對標準差。
(八)偵測極限與定量極限試驗
1. 偵測極限(Limit of Detection, LOD):將已知濃度之標準品溶液不斷稀釋,並以訊號雜訊比為≧ 3:1時之濃度,作為偵測極限估計值。
2. 定量極Limit of Quantitation, LOQ):將已知濃度之標準品溶液不斷稀釋,並以訊號雜訊比為≧ 10/1時之濃度,作為定量極限估計值。
(九)添加回收率試驗
取本品粉末約0.2 g,精確秤定三份,分別加入4.0 、8.0 、16.0 mg的蒼朮素(Atractylodin),並按檢品溶液製備方法製備,每次取10 μL注入液相層析儀,每個檢測品進行三重複。 |