方法
（一）溶劑配製
水：甲醇(90：10至55：45)之混液。
（二）對照標準品溶液
取標準品杯莧甾酮(Cyasterone)精確秤定10.0 mg，加甲醇定體積至10 mL製成每1 mL含1.0 mg杯莧甾酮。
（三）檢品溶液
取本品粉末約0.8 g，精確秤定，置50 mL三角錐形瓶中，加入80%甲醇10 mL，超音波震盪處理(功率200 W，頻率40 kHz) 30分鐘；重複提取1次，合併萃取液，取上清液以No.1濾紙過濾，再經微孔濾膜(Syringe filter, 0.45 mm)過濾，加80%甲醇定量至25 mL，即得。
（四）測定法
分別精確吸取標準品溶液與檢品溶液10 mL，注入液相層析儀，測定，用標準曲線計算溶液中杯莧甾酮(Cyasterone)的含量，即得。
（五）檢量線
精確吸取杯莧甾酮(Cyasterone)標準品儲備溶液(1.0 mg/mL)各100、500、1000、2000、5000 mL，以甲醇溶液定體積至10 mL配製成杯莧甾酮(Cyasterone)分別為10、50、100、200、500、1000 mg/mL的標準品溶液。以上溶液各取10 mL分別注入液相層析儀進行定量分析，利用標準品之波鋒面積(y軸)和標準品之濃度 (x軸)進行線性回歸，並求得檢量線之方程式y = ax + b與相關係數R2。
（六）精密度試驗
以杯莧甾酮(Cyasterone)濃度為100 mg/mL之標準品儲備液連續進樣五針，以杯莧甾酮波峰面積為指標，求出相對標準差。
（七）再現性與穩定性試驗
1. 再現性：取同一家市售川牛膝粉末，依川牛膝檢品溶液製備方法平行製備五份川牛膝檢品溶液，進樣測定，以杯莧甾酮(Cyasterone)的含量(%)為指標，求出相對標準差。
2. 穩定性：取同一家市售川牛膝粉末，依川牛膝檢品溶液製備方法製備川牛膝檢品溶液，分別在0、2、4、8、16、24小時進樣測定，以杯莧甾酮(Cyasterone)的含量為指標，求出相對標準差。
（八）偵測極限與定量極限試驗
1. 偵測極限(Limit of Detection, LOD)：將已知濃度之標準品溶液不斷稀釋，並以訊號雜訊比為≧ 3:1時之濃度，作為偵測極限估計值。
2. 定量極Limit of Quantitation, LOQ)：將已知濃度之標準品溶液不斷稀釋，並以訊號雜訊比為≧ 10/1時之濃度，作為定量極限估計值。
（九）添加回收率試驗
取本品粉末約1.0 g，精確秤定三份，分別加入2.0 、3.0 、4.0 mg的杯莧甾酮(Cyasterone)，並按檢品溶液製備方法製備，每次取10 μL注入液相層析儀，每個檢測品進行三重複。 |
