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木賊
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溶媒系統與觀察方式

萃法選擇及濃度測試

實驗日期:109/04/24

相對溼度(RH):48%

溫度(RT):25.8 ℃

【展開劑4】  (自行開發2) ──正己烷:乙酸乙酯:甲酸:冰乙酸 (10:6:0.5:0.5)

─HPTLC 5%三氧化鋁/乙醇顯色後紫外光(365 nm)檢出

編號

名稱

點注量

1,2,3

山柰素(1.0 mg/mL)

1,2,5 μL

4,5,6

檢品溶液5【萃取方法1】

1,2,5 μL

7,8,9

檢品溶液5【萃取方法2】

1,2,5 μL

 

建議萃法:2種萃法之檢品溶液中皆有分離與檢出標準品山柰素,由於萃取方法較簡易,故採用【萃取方法2】。

建議點注量:山柰素1 μL,檢品溶液【萃取方法2】2 μL

 

三、溶媒系統選擇

實驗日期:109/04/24

相對溼度(RH):48%

溫度(RT):25.8 ℃

【展開劑1】 (修飾臺灣中藥典第三版2018) ──正己烷:乙酸乙酯:甲酸 (1:1:0.1)

【萃取方法2】(自行開發)──HPTLC 5%三氧化鋁/乙醇顯色後紫外光(365 nm)檢出(山柰素Rf值為0.68)

 

【展開劑2】 (修飾中華人民共和國藥典2015)──正己烷:乙酸乙酯:甲酸 (8:4:0.4)

【萃取方法2】(自行開發)──HPTLC 5%三氧化鋁/乙醇顯色後紫外光(365 nm)檢出(山柰素Rf值為0.33)

 


 

 

 

【展開劑3】 (自行開發1)──正己烷:乙酸乙酯:冰乙酸 (10:6:1)

【萃取方法2】(自行開發) ─HPTLC 5%三氧化鋁/乙醇顯色後紫外光(365 nm)檢出(山柰素Rf值為0.44)

 

【展開劑4】 (自行開發2) ──正己烷:乙酸乙酯:甲酸:冰乙酸 (10:6:0.5:0.5)P

【萃取方法2】(自行開發) ──HPTLC 5%三氧化鋁/乙醇顯色後紫外光(365 nm)檢出(山柰素Rf值為0.44)

1:Blank

2:山柰素

3,4:檢品溶液5

5:Spike

建議溶媒系統:以【萃取方法2】方式,以自行開發之【展開劑4】展開,山柰素之Rf值適中,分離也較佳,故採用自行開發之【展開劑4】。

 

四、觀察方式選擇

實驗日期:109/04/24

相對溼度(RH):48%

溫度(RT):25.8 ℃

【展開劑4】(自行開發2) ──正己烷:乙酸乙酯:甲酸:冰乙酸 (10:6:0.5:0.5)

【萃取方法2】(自行開發)  ─HPTLC可見光檢出

【萃取方法2】(自行開發)  ─ HPTLC紫外光(365 nm)檢出

【萃取方法2】(自行開發)  ─HPTLC 5%三氯化鋁/乙醇顯色後紫外光(254 nm)檢出

【萃取方法2】(自行開發)  ─ HPTLC5%三氯化鋁/乙醇顯色後紫外光(365 nm)檢出P

 

1:Blank                                                

2:山柰素

3,4:檢品溶液5

5:Spike

建議觀察方式:5%三氯化鋁/乙醇顯色後於可見光及紫外光(365 nm),有較明顯分離之條帶。

 

五、十批木賊樣品檢測

實驗日期:109/04/27

相對溼度(RH):45%

溫度(RT):24 ℃

【展開劑4】(自行開發2) ──正己烷:乙酸乙酯:甲酸:冰乙酸 (10:6:0.5:0.5)

【萃取方法2】(自行開發) ──HPTLC 5%三氯化鋁/乙醇顯色紫外光(365 nm)檢出

1

Blank

2

山柰素

3,4

檢品溶液1 (NC)

5,6

檢品溶液2 (ND)

7,8

檢品溶液3 (NF)

9,10

檢品溶液4 (NJ)

11,12

檢品溶液5 (NR)

13

Spike (檢品溶液5)

 

 

 

 

【展開劑4】(自行開發2) ──正己烷:乙酸乙酯:甲酸:冰乙酸 (10:6:0.5:0.5)

【萃取方法2】(自行開發) ──HPTLC 5%三氯化鋁/乙醇顯色紫外光(365 nm)檢出

1

Blank

2

山柰素

3,4

檢品溶液6 (CA)

5,6

檢品溶液7 (SA)

7,8

檢品溶液8 (SC)

9,10

檢品溶液9 (SG)

11,12

檢品溶液10 (SU)

13

Spike (檢品溶液5)

 

結論與建議:以自行開發之【萃取方法2】方式,以自行開發之【展開劑4】分離與檢出山柰素較佳,以5%三氯化鋁/乙醇顯色後於紫外光(365 nm)下檢視較佳。