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兒茶
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溶媒系統與觀察方式

萃法選擇及濃度測試

實驗日期:109/01/08

相對溼度(RH):41%

溫度(RT):25.5 ℃

【展開劑2】 (自行開發) ──甲苯:乙酸乙酯:甲酸 (4:4:1)

─HPTLC 10%硫酸/乙醇顯色後可見光檢出

─HPTLC 10%硫酸/乙醇顯色後紫外光(365 nm)檢出

編號

名稱

點注量

1,2,3

兒茶素(1.0 mg/mL)

1,2,5 μL

4,5,6

表兒茶素(1.0 mg/mL)

1,2,5 μL

7,8,9

檢品溶液8【萃取方法1】

1,2,5 μL

10,11,12

檢品溶液8【萃取方法2】

1,2,5 μL

 

建議萃法:2種萃法之檢品溶液中皆有分離與檢出標準品兒茶素,但未檢出表兒茶素,擇一選擇,故採用自行開發之【萃取方法2】。

建議點注量:兒茶素標準品溶液5 μL,表兒茶素標準品溶液5 μL,檢品溶液【萃取方法1】2 μL

 

三、溶媒系統選擇

實驗日期:109/01/08

相對溼度(RH):41%

溫度(RT):25.5 ℃

【展開劑1】 (臺灣中藥典第三版2018) ──正丁醇:冰乙酸:水 (3:2:1)

【萃取方法2】(自行開發) ──HPTLC 10%硫酸/乙醇顯色後可見光檢出(兒茶素Rf值為0.78,表兒茶素Rf值為0.78)

【萃取方法2】(自行開發)──HPTLC 10%硫酸/乙醇顯色後紫外光(365 nm)檢出(Rf值為0.78,表兒茶素Rf值為0.78)

1:Blank

2:兒茶素

3:表兒茶素

4,5:檢品溶液8

6:Spike

 



【展開劑2】(自行開發) ──甲苯:乙酸乙酯:甲酸 (4:4:1) P

【萃取方法2】(自行開發)──HPTLC 10%硫酸/乙醇顯色後可見光檢出(兒茶素Rf值為0.33,表兒茶素Rf值為0.30)

【萃取方法2】(自行開發)──HPTLC 10%硫酸/乙醇顯色後紫外光(365 nm)檢出(兒茶素Rf值為0.33,表兒茶素Rf值為0.30)

 

 

1:Blank

2:兒茶素

3:表兒茶素

4,5:檢品溶液8

6:Spike

 

建議溶媒系統:以【萃取方法2】方式及【展開劑2】展開條件下,由於分離效果較佳,且指標成分Rf值較趨近於中間值,故採用自行開發之【展開劑2】。

 

 

四、觀察方式選擇

實驗日期:108/01/08

相對溼度(RH):41%

溫度(RT):25.5 ℃

【展開劑2】 (自行開發) ──甲苯:乙酸乙酯:甲酸 (4:4:1)

【萃取方法2】(自行開發) ─HPTLC可見光檢出

 

【萃取方法2】(自行開發) ─ HPTLC紫外光(365 nm)檢出

 
 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

【萃取方法2】(自行開發) ─HPTLC 10%硫酸/乙醇顯色後可見光檢出P

 

【萃取方法2】(自行開發) ─ HPTLC10%硫酸/乙醇顯色後紫外光(365 nm)檢出P

 

 
 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

1:Blank

2:兒茶素

3:表兒茶素

4,5:檢品溶液8

6:Spike

 

建議觀察方式:10%硫酸/乙醇顯色後於可見光或紫外光(365 nm)下檢視,皆有較明顯分離之條帶。

 

五、十批兒茶樣品檢測

實驗日期:109/01/09

相對溼度(RH):41%

溫度(RT):24.3 ℃

【展開劑2】 (自行開發) ──甲苯:乙酸乙酯:甲酸 (4:4:1)

【萃取方法2】(自行開發) ─ HPTLC 10%硫酸/乙醇顯色後可見光檢出

【萃取方法2】(自行開發) ─ HPTLC 10%硫酸/乙醇顯色後紫外光(365 nm)檢出

1

Blank

2

兒茶素(1.0 mg/mL)

3

表兒茶素(1.0 mg/mL)

4,5

檢品溶液1 (NF)

6,7

檢品溶液2 (SUB)

8,9

檢品溶液3 (ND)

10,11

檢品溶液4 (SG)

12,13

檢品溶液5 (SUCC)

14

Spike (檢品溶液8)

 


 

【展開劑2】 (自行開發) ──甲苯:乙酸乙酯:甲酸 (4:4:1)

【萃取方法2】(自行開發) ─ HPTLC 10%硫酸/乙醇顯色後可見光檢出

【萃取方法2】(自行開發) ─ HPTLC 10%硫酸/乙醇顯色後紫外光(365 nm)檢出

1

Blank

2

兒茶素(1.0 mg/mL)

3

表兒茶素(1.0 mg/mL)

4,5

檢品溶液6 (CA)

6,7

檢品溶液7 (NJ)

8,9

檢品溶液8 (SE)

10,11

檢品溶液9 (SUBB)

12,13

檢品溶液10 (SUC)

14

Spike (檢品溶液8)

 

結論與建議:以自行開發之【萃取方法2】方式,並以自行開發之【展開劑2】分離與檢出兒茶素較佳,於可見光或紫外光(365 nm)下檢視較佳。由於表兒茶素含量很少,不易檢出,建議不訂表兒茶素為對照標準品。