萃法選擇及濃度測試
實驗日期:109/01/08
相對溼度(RH):41%
溫度(RT):25.5 ℃
【展開劑2】 (自行開發) ──甲苯:乙酸乙酯:甲酸 (4:4:1)
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─HPTLC 10%硫酸/乙醇顯色後可見光檢出
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─HPTLC 10%硫酸/乙醇顯色後紫外光(365 nm)檢出
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編號
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名稱
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點注量
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1,2,3
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兒茶素(1.0 mg/mL)
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1,2,5 μL
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4,5,6
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表兒茶素(1.0 mg/mL)
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1,2,5 μL
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7,8,9
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檢品溶液8【萃取方法1】
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1,2,5 μL
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10,11,12
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檢品溶液8【萃取方法2】
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1,2,5 μL
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建議萃法:2種萃法之檢品溶液中皆有分離與檢出標準品兒茶素,但未檢出表兒茶素,擇一選擇,故採用自行開發之【萃取方法2】。
建議點注量:兒茶素標準品溶液5 μL,表兒茶素標準品溶液5 μL,檢品溶液【萃取方法1】2 μL。
三、溶媒系統選擇
實驗日期:109/01/08
相對溼度(RH):41%
溫度(RT):25.5 ℃
【展開劑1】 (臺灣中藥典第三版2018) ──正丁醇:冰乙酸:水 (3:2:1)
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【萃取方法2】(自行開發) ──HPTLC 10%硫酸/乙醇顯色後可見光檢出(兒茶素Rf值為0.78,表兒茶素Rf值為0.78)
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【萃取方法2】(自行開發)──HPTLC 10%硫酸/乙醇顯色後紫外光(365 nm)檢出(Rf值為0.78,表兒茶素Rf值為0.78)
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1:Blank
2:兒茶素
3:表兒茶素
4,5:檢品溶液8
6:Spike
【展開劑2】(自行開發) ──甲苯:乙酸乙酯:甲酸 (4:4:1) P
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【萃取方法2】(自行開發)──HPTLC 10%硫酸/乙醇顯色後可見光檢出(兒茶素Rf值為0.33,表兒茶素Rf值為0.30)
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【萃取方法2】(自行開發)──HPTLC 10%硫酸/乙醇顯色後紫外光(365 nm)檢出(兒茶素Rf值為0.33,表兒茶素Rf值為0.30)
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1:Blank
2:兒茶素
3:表兒茶素
4,5:檢品溶液8
6:Spike
建議溶媒系統:以【萃取方法2】方式及【展開劑2】展開條件下,由於分離效果較佳,且指標成分Rf值較趨近於中間值,故採用自行開發之【展開劑2】。
四、觀察方式選擇
實驗日期:108/01/08
相對溼度(RH):41%
溫度(RT):25.5 ℃
【展開劑2】 (自行開發) ──甲苯:乙酸乙酯:甲酸 (4:4:1)
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【萃取方法2】(自行開發) ─HPTLC可見光檢出
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【萃取方法2】(自行開發) ─ HPTLC紫外光(365 nm)檢出
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【萃取方法2】(自行開發) ─HPTLC 10%硫酸/乙醇顯色後可見光檢出P
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【萃取方法2】(自行開發) ─ HPTLC10%硫酸/乙醇顯色後紫外光(365 nm)檢出P
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1:Blank
2:兒茶素
3:表兒茶素
4,5:檢品溶液8
6:Spike
建議觀察方式:10%硫酸/乙醇顯色後於可見光或紫外光(365 nm)下檢視,皆有較明顯分離之條帶。
五、十批兒茶樣品檢測
實驗日期:109/01/09
相對溼度(RH):41%
溫度(RT):24.3 ℃
【展開劑2】 (自行開發) ──甲苯:乙酸乙酯:甲酸 (4:4:1)
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【萃取方法2】(自行開發) ─ HPTLC 10%硫酸/乙醇顯色後可見光檢出
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【萃取方法2】(自行開發) ─ HPTLC 10%硫酸/乙醇顯色後紫外光(365 nm)檢出
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1
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Blank
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2
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兒茶素(1.0 mg/mL)
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3
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表兒茶素(1.0 mg/mL)
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4,5
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檢品溶液1 (NF)
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6,7
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檢品溶液2 (SUB)
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8,9
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檢品溶液3 (ND)
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10,11
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檢品溶液4 (SG)
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12,13
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檢品溶液5 (SUCC)
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14
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Spike (檢品溶液8)
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【展開劑2】 (自行開發) ──甲苯:乙酸乙酯:甲酸 (4:4:1)
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【萃取方法2】(自行開發) ─ HPTLC 10%硫酸/乙醇顯色後可見光檢出
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【萃取方法2】(自行開發) ─ HPTLC 10%硫酸/乙醇顯色後紫外光(365 nm)檢出
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1
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Blank
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2
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兒茶素(1.0 mg/mL)
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3
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表兒茶素(1.0 mg/mL)
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4,5
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檢品溶液6 (CA)
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6,7
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檢品溶液7 (NJ)
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8,9
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檢品溶液8 (SE)
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10,11
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檢品溶液9 (SUBB)
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12,13
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檢品溶液10 (SUC)
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14
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Spike (檢品溶液8)
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結論與建議:以自行開發之【萃取方法2】方式,並以自行開發之【展開劑2】分離與檢出兒茶素較佳,於可見光或紫外光(365 nm)下檢視較佳。由於表兒茶素含量很少,不易檢出,建議不訂表兒茶素為對照標準品。
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